Метод проведения процедуры криоконсервации эмбрионов

Наиболее популярная процедура искусственного оплодотворения — ЭКО. Для ее проведения осуществляется забор яйцеклеток с их последующим осеменением вне тела матери.

Часто число извлеченных и оплодотворенных репродуктивных клеток превышает необходимое количество. В таком случае репродуктологи предлагают паре прибегнуть к криоконсервации эмбрионов.

Для чего и как проводят данную процедуру?

Понятие криоконсервации

Криоконсервация – это способ хранения биологических материалов при низких температурах, позволяющий сохранить их жизнеспособность после размораживания. Криоконсервацию оплодотворенных ооцитов проводят при помощи жидкого азота, имеющего температуру 196 градусов ниже нуля.

При замораживании приостанавливается деление клеток, но сохраняются их биологические характеристики. Для криоконсервации отбирают только качественных эмбрионов, не имеющих признаков аномального развития.

Для чего проводят криоконсервацию эмбрионов?

Перед процедурой ЭКО большинство женщин подвергают медикаментозной стимуляции яичников, в результате которой удается извлечь от 7 до 20 способных к оплодотворению клеток. Оплодотворяют яйцеклетки с лучшими показателями. Для переноса в матку достаточно 2–3 штук. Криоконсервация эмбрионов проводится по следующим причинам:

• Оплодотворенные ооциты можно использовать в случае, если текущая попытка ЭКО будет неудачной. Вероятность успеха искусственного оплодотворения с первого раза составляет 25–45% в зависимости от различных сопутствующих факторов. Многим парам приходится обращаться к ЭКО дважды, трижды и более.
• Женщина в дальнейшем хочет стать суррогатной матерью.
• Накопление нескольких эмбрионов для подсадки. Некоторым пациенткам противопоказана стимуляция яичников. В естественном цикле можно получить всего 1 яйцеклетку.
• На момент подсадки у потенциальной матери выявили инфекционные заболевания, которые препятствуют успешному вынашиванию ребенка. При заморозке эмбрионов можно осуществить подсадку после выздоровления женщины.
• Один из родителей болен онкологическим заболеванием. Криоконсервация ооцитов после осеменения дает шанс на рождение собственного ребенка независимо от того, как лечение онкологии повлияет на организм.
• Пара планирует родить второго малыша спустя некоторое время.
• Повторная процедура стимуляции яичников невозможна из-за плохой реакции женщины на лекарственные препараты.
• Эмбрионы сохраняются как донорский материал для бездетных пар.

Достоинства и недостатки метода

Широкое применение криозаморозки эмбрионов обусловлено рядом достоинств данной процедуры:

• в случае повторного проведения ЭКО женщина будет избавлена от необходимости подвергаться воздействию препаратов, стимулирующих гиперовуляцию,
• наличие замороженных эмбрионов снижает стоимость подготовительного этапа ЭКО,
• увеличиваются шансы на успех, поскольку замороженные эмбрионы уже начали делиться,
• у будущей матери не развивается синдром гиперстимуляции яичников,
• есть возможность выбрать наиболее благоприятное время для подсадки,
• материалом могут воспользоваться пары, половые клетки которых непригодны для рождения потомства.

Основной недостаток криозаморозки – риск гибели некоторых замороженных оплодотворенных ооцитов.

Замораживание – это неестественный для зародышей процесс, поэтому часть биоматериала не выдерживает воздействия низкой температуры, а часть погибает при размораживании.

Также при криоконсервации не исключается влияние человеческого фактора. Небольшое отклонение от техники проведения процедуры приводит к необратимым последствиям.

Как проводится криоконсервация?

Для криоконсервирования выбирают эмбрионов, достигших стадии бластоцисты. Такой зародыш лучше имплантируется после размораживания. Эмбрионы обрабатывают криопротектором, предотвращающим гибель биоматериала, и помещают в специальные контейнеры в виде трубочки. В одной трубке могут находиться 5–6 оплодотворенных яйцеклеток.

Емкости размещают в криобанке и замораживают. Существуют 2 типа заморозки:

• Медленная. Данная методика предусматривает регулируемое замораживание материала. Его охлаждают со скоростью 1 градус в минуту. При определенной температуре их погружают в жидкий азот. Данный метод имеет высокие показатели гибели эмбрионов, поскольку во время охлаждения увеличивается риск образования кристаллов льда внутри бластоцисты.
• Быстрая (витрификация). Более дорогой, но результативный способ заморозки. Зародыши замерзают, но клетки не кристаллизируются. В бластоцисте образуется желеподобная субстанция, сохраняющая жизнеспособность эмбриона.

Длительность хранения биоматериала в криобанке зависит от желания пары. Зародыши могут храниться в охлажденном состоянии от нескольких недель до десятков лет.

Размораживание эмбрионов и их подсадка

Разморозку эмбрионов осуществляют при комнатной температуре. После оттаивания их помещают в питательную среду. Если клетки были заморожены на стадии бластоцисты, то подсадку нужно делать в день разморозки. В случае криоконсервации более молодых эмбрионов их держат в питательной среде до достижения нужной стадии.

Для того чтобы подсадка прошла успешно, женщину предварительно готовят к процедуре. Главное условие – подготовка матки. Эмбрионы могут прижиться только в том случае, если период переноса совпадает с овуляцией. Используют разные протоколы ЭКО:

• Подсадка в естественном цикле. Отслеживается естественный цикл женщины. Для уточнения подходящего дня проводятся анализы на гормоны и ежедневный контроль при помощи УЗИ.
• Стимуляция овуляции. На протяжении определенного времени будущая мама принимает гормональные препараты, стимулирующие подготовку репродуктивных органов к оплодотворению.

Перед переносом зародыша в матку женщине назначают лекарства с прогестероном. Они способствуют восприимчивости эндометрия и поддержанию беременности после имплантации бластоцисты. Чаще всего рекомендуют Утрожестан и Дюфастон. Эмбрион вводят в матку при помощи катетера, проведенного через шейку в маточную полость.

От чего зависит успешность подсадки замороженных эмбрионов?

Успешность переноса размороженных ооцитов в матку зависит от нескольких факторов:

• Возраста будущей мамы. Наибольшие шансы на успех у женщин до 30 лет. После 40 результативность процедуры снижается в несколько раз.
• Причин, вызвавших бесплодие. При патологиях маточных труб беременность сохраняется чаще, чем при эндокринных или гормональных нарушениях.
• Здоровья пациентки. Если организм женщины ослаблен хроническими заболеваниями, вынашивание ребенка осложняется.
• Предшествующей и сопутствующей медикаментозной поддержки.
• Количества подсаженных эмбрионов. Репродуктологи рекомендуют использовать не менее 2 оплодотворенных клеток при одной подсадке.
• Наличия осложнений во время беременности в прошлом.

Влияет ли криоконсервация на дальнейшее развитие ребенка?

Многие семейные пары опасаются, что криоконсервация приведет к нарушениям развития малыша. Опасения вызваны пребыванием зародыша длительное время в неестественной среде. Однако многочисленные исследования показали, что дети, зачатые после подсадки размороженных эмбрионов, не отличаются от родившихся при естественном зачатии.

Напротив, использование размороженного биоматериала позволяет сократить вероятность рождения ребенка с генетическими отклонениями. Это достигается благодаря тщательному отбору наиболее качественного материала и контролю над делением клеток. Эмбрионы полностью сохраняют генетику родителей.

Стоимость проведения процедуры

Сколько будет стоить криоконсервация оплодотворенных клеток, зависит от нескольких факторов:

• количества эмбрионов,
• длительности хранения,
• метода заморозки,
• места хранения.

Витрификация стоит значительно дороже медленной заморозки, однако она обеспечивает лучшую сохранность бластоцист. При хранении материала в отдельном хранилище потенциальным родителям также придется заплатить дополнительную сумму. Немалое значение имеет известность клиники, в которой находится криобанк.

Примерная стоимость заморозки одной емкости – 15 тыс. руб. Если нужно заморозить несколько, за каждую из них должно быть выплачено 6-8 тыс. руб. Стоимость хранения материала составляет в среднем 800–1500 руб. При размораживании нужно заплатить еще 18–20 тыс. руб. При индивидуальном хранении эмбрионов запрашивают еще около 4 тыс. руб.

В некоторых клиниках предусмотрены только отдельные хранилища. В таком случае месяц хранения материала будет составлять около 2 тыс. руб.

Загрузка…

Как происходит криоконсервация ооцитов: все о методе и подготовке

Оглавление

• История криоконсервации
• Как происходит криоконсервация яйцеклеток?
• Размораживание ооцитов
• Применение криоконсервации яйцеклеток
• Преимущества и проблемы криоконсервации ооцитов
• Подготовка к криоконсервации ооцитов
• Стоимость криоконсервации яйцеклеток

Сделайте первый шаг — запишитесь на прием к врачу!

Одна из проблем репродуктивной медицины заключалась в сохранении генетического материала, используемого при оплодотворении. Дело в том, что яйцеклетки жизнеспособны в течение всего 2 суток, по истечении этого срока зачатие с их помощью невозможно.

Это существенно осложняет проведение ЭКО, ведь в подавляющем большинстве случаев нужно выполнить несколько процедур для успешной имплантации. Решить данную проблему позволяет криоконсервация ооцитов при сверхнизкой температуре. Эта технология позволяет сохранять генетический материал женщины в жизнеспособном состоянии неограниченно долго.

На данный момент она широко используется в медицинской практике центров репродуктологии по всему миру.

История криоконсервации

О сохранении биологического материала с помощью низкой температуры человек задумывался давно.

Тем более, что на такую мысль наталкивает сама природа – всем известны лягушки, впадающие в ледяной анабиоз зимой и успешно оживающие после оттаивания.

Учеными неоднократно делались попытки замораживания отдельных органов и даже целых живых организмов (лабораторных мышей), однако из-за несовершенства технологии результаты этих опытов были не слишком успешными.

Куда больших результатов удалось достичь в криоконсервации клеток и тканей. Уже в 1954 году было успешно проведено первое искусственное оплодотворение с использованием замороженной спермы. Однако, на тот момент использовалась несовершенная технология постепенного замораживания, из-за чего в некоторых клетках образовывались кристаллы льда, и часть из них разрушалась.

Лишь в 1983 году было проведено первое искусственное оплодотворение с использованием криоконсервированных яйцеклеток, а затем и эмбрионов. Постепенно с развитием технологий замораживания, эта процедура стала штатно использоваться для хранения генетического материала в донорских банках и центрах репродуктологии.

Как происходит криоконсервация яйцеклеток?

Эффективность этой процедуры сильно зависит от технологий, которые используются для сохранения ооцитов. В настоящее время используются три основных метода криоконсервации:

• Постепенное замораживание. Исторически первая технология, появившаяся и опробованная на практике еще в середина прошлого века. Ее суть заключается в постепенном (со скоростью -1°С в минуту) понижении температуры клеток до -196°С. При этом происходит частичная дегидратация (обезвоживание) ооцитов. Недостатком этого метода является разрушение части клеток из-за образования в них микрокристаллов льда и соли. Поэтому сегодня постепенное замораживание в репрудоктологии применяется сравнительно редко.
• Витрификация (быстрая заморозка). Этот метод основан на эффекте фазового перехода воды из жидкого состояния в твердое аморфное (стеклообразное), минуя этап кристаллизации. В результате жидкость в ооцитах замерзает, не повреждая структуру клеток. Витрификация достигается за счет моментального охлаждения биоматериала с помощью жидкого азота до температуры -196°С.
• Использование криопротекторов. Хотя витрификация демонстрирует высокую эффективность и низкий процент поврежденных клеток, остается вероятность того, что ооцит при быстром замораживании будет разрушен. Чтобы этого не произошло, в клетках предварительно вода заменяется на специальные вещества (криопротекторы), препятствующие образованию кристаллов.

В настоящее время общепринятой в репродуктивной медицине практикой является сочетание последних двух методов. Это позволило повысить выживаемость клеток до 90%, что сегодня считается нормой.

Ооциты помещаются в раствор криопротектора, который постепенно вытесняет из них воду.

Затем яйцеклетки в тонкостенных капсулах устанавливаются в сосудах Дьюара, наполненные жидким азотом, где и происходит их замораживание.

При ЭКО криоконсервация яйцеклеток требует их большого количества с расчетом на проведение повторных процедур оплодотворения. Это объясняется тем, что даже полностью здоровые оплодотворенные яйцеклетки не всегда приживаются в матке после имплантации.

Для этого пациентке назначается курс гормональной стимуляции яичников. Благодаря этой технологии за 1 менструальный цикл в организме женщины образуется не 1, а 5-8 созревших ооцитов.

1-2 из них отбираются для непосредственно процедуры оплодотворения, остальные – замораживаются для дальнейшего использования.

Сделайте первый шаг — запишитесь на прием к врачу!

Размораживание ооцитов

Возвращение замороженных ооцитов к нормальному состоянию для последующей пересадки происходит постепенно. Врач медленно понижает концентрацию криопротектора в клетках, вытесняя его водой.

После того, как ооциты достигают температуры тела, их оплодотворяют спермой донора или супруга пациентки.

Полученные эмбрионы 3-5 дней содержатся в инкубаторе, где развиваются до стадии начального дробления или бластоцисты и пересаживаются пациентке.

Размораживание, выполненное с соблюдением правильной технологии, не наносит никакого вреда клеткам и не снижает их фертильность.

Напротив, по некоторым исследованиям вероятность наступления беременности при ЭКО с использованием размороженного материала на 15% выше, чем с применением «свежих» клеток.

Это объясняется тем, что при криоконсервации ооцитов проводятся дополнительные исследования, позволяющие точнее установить фертильность биоматериала.

Применение криоконсервации яйцеклеток

Замораживание яйцеклеток – процедура добровольная и проводится только с письменного согласия пациентки. Она проводится по следующим медицинским и социальным показаниям:

• Для повторных процедур ЭКО. При экстракорпоральном оплодотворении пациентке подсаживается 1-2 оплодотворенные яйцеклетки. Однако, после гормональной стимуляции яичников за 1 менструальный цикл их получают до 8 штук. С учетом того, что имплантированные эмбрионы приживаются не всегда, оставшиеся после первой процедуры ЭКО ооциты криоконсервируются для использования в повторных попытках. Это позволяет избежать повторной стимуляции, которая оказывает негативное воздействие на организм женщины. Более того, криоконсервация в естественном цикле позволяет накопить достаточное количество биоматериала женщинам, которым гормональная стимуляция строго противопоказана.
• Отложенное материнство. Многие молодые женщины желают иметь детей, но откладывают это на поздние сроки ради карьеры или по каким-либо иным немедицинским причинам. Однако, с возрастом из-за естественных изменений в женском организме повышается вероятность бесплодия и рождения ребенка с врожденными дефектами. В этом случае криоконсервация яйцеклеток используется как страховка на будущее.
• Сохранение онкофертильности. Некоторым женщинам приходится откладывать планирование беременности из-за прохождения химио- или радиотерапии от онкологических заболеваний. Излучение и химические препараты, используемые против опухолей, негативно влияют на развитие и жизнеспособность яйцеклеток. В этой ситуации перед лечением они проходят курс гормональной стимуляции для получения нескольких (6-8) здоровых ооцитов, которые криоконсервируются до тех пор, пока пациентка не восстановится после терапии.
• Донорство яйцеклеток. Женщины, уже имеющие здорового ребенка, могут стать донором ооцитов для пациенток с диагностированным бесплодием (безвозмездно или за денежное вознаграждение). Они также проходят курс гормональной стимуляции, после чего их яйцеклетки сохраняются в криобанке и используются в ЭКО.

Таким образом, воспользоваться услугой криоконсервации яйцеклеток могут не только пациентки со сниженным овариальным резервом или готовящиеся к лечению от онкологических заболеваний, но и вполне здоровые женщины, не имеющие проблем с репродуктивной функцией. Наличие собственных замороженных яйцеклеток – хороший задел на будущее, если возникнет потребность снова стать матерью.

Преимущества и проблемы криоконсервации ооцитов

Криоконсервация яйцеклеток в Москве в нашем медицинском центре – эффективная репродуктивная технология, обеспечивающая высокую сохранность генетического материала женщины. По статистике, до 80% замороженных ооцитов остаются способными к оплодотворению после размораживания.

Клетки могут содержаться в криобанке неограниченно долгое время. В медицинской практике известен случай успешного оплодотворения и рождения ребенка с помощью яйцеклетки, хранившейся 30 лет.

В рамках ЭКО криоконсервация никак не влияет на организм будущего малыша, не вызывает каких-либо генетических отклонений.

Сделайте первый шаг — запишитесь на прием к врачу!

Однако, у этой технологии имеются и недостатки, хотя с самим замораживанием они связаны косвенно:

• Опасность гиперстимуляции. Для получения большого числа здоровых ооцитов в одном менструальном цикле женщина проходит курс гормональной стимуляции яичников. Интенсивное воздействие гормонов способно вызвать синдром гиперстимуляции, сопровождающийся многочисленными физиологическими нарушениями различной тяжести. Для предотвращения негативного эффекта от этой процедуры врач назначает каждой пациентке индивидуальный курс, подбирая дозу и периодичность гормональных инъекций исходя из ее медицинских показания.
• Осложнения при пункции яичников. Извлечение созревших яйцеклеток из организма пациентки выполняется аспирационной иглой. В редких случаях (например, при недостаточной квалификации врача) этот инструмент может повредить матку, кишечник и другие органы малого таза, вызвать кровотечение, инфекционное заражение. Такие ситуации встречаются редко – чтобы их избежать, нужно проходить процедуру в профессиональных центрах репродуктологии у опытного специалиста.
• Эмоциональные риски. При всей эффективности технологии криоконсервации ооцитов она не всесильна. Определенный процент яйцеклеток после размораживания теряет фертильность. Неудачная попытка оплодотворения может вызвать у пациентки разочарование и эмоциональную подавленность.

Несмотря на эти риски и достаточно высокую цену, криоконсервация яйцеклеток полностью себя оправдывает. Эта технология помогает тысячам женщин с различной жизненной ситуацией стать счастливой матерью.

Подготовка к криоконсервации ооцитов

Проходить эту процедуру рекомендуется женщинам возрастом до 35 лет – выше этого предела резко возрастает количество хромосомных мутаций в яйцеклетках, что отрицательно сказывается на их качестве. Однако и пациентки, подходящие под это требование, проходят комплексное медицинское обследование, включающее:

• Анализы крови (общий, биохимический, гормональный, на наличие ВИЧ, гепатитов В и С, сифилиса);
• Анализ мочи (общий и гормональный);
• Мазки из влагалища и шейки матки для гистологического и цитологического исследований, половые инфекции;
• Ультразвуковое обследование органов малого таза и молочных желез.

Перечень диагностических процедур может быть расширен в зависимости от особенностей организма пациентки и результатов проведенных обследований. Непосредственно перед пункцией фолликулов женщине также необходимо соблюсти несколько правил:

• За 2 недели до процедуры исключить употребление кофеиносодержащих продуктов и алкоголя, а также курение;
• за 2-3дня до пункции отказаться от любой сексуальной активности (в том числе мастурбации);
• За 8 часов до забора яйцеклеток необходимо прекратить прием пищи, за 2 часа — жидкостей.

Более подробные рекомендации по подготовке к процедуре пациентке предоставит лечащий врач. Сама криоконсервация ооцитов никаких предварительных действий со стороны женщины не требует – она проводится в лабораторных условиях и не зависит от ее участия.

Стоимость криоконсервации яйцеклеток

Хранение биоматериала в криобанке являются платными. Получение, исследование, отбор, обработка и заморозка клеток – мероприятия трудозатратные. Это обуславливает достаточно высокую стоимость услуги. На конкретную цену криоконсервация ооцитов влияют:

• Количество яйцеклеток, предусмотренных для хранения;
• Число диагностических исследований перед получением биоматериала;
• Наличие или отсутствие этапа стимуляции яичников;
• Используемый метод криоконсервации;
• Срок хранения замороженных ооцитов.

Сделайте первый шаг — запишитесь на прием к врачу!

Цены на эту услугу разнятся в зависимости от учреждения, где она предоставляется. В нашем медицинском центре в Москве стоимость криоконсервации яйцеклеток составляет от 21 000 рублей.

При этом мы проводим полный комплекс диагностических исследований пациентки, индивидуальный курс гормональной терапии, тщательный анализ и подготовку биоматериала перед его заморозкой.

Это обеспечивает максимальную сохранность клеток и высокие шансы на наступление беременности при экстракорпоральном оплодотворении с их использованием.

Криоконсервация эмбрионов и сперматозоидов

Криоконсервация – это особый процесс замораживания половых клеток и эмбрионов для хранения на неопределенный срок, при этом их биологические функции сохраняются после размораживания. Благодаря криоконсервации у бесплодных пар появляется возможность воспользоваться донорским генетическим материалом, чтобы обрести долгожданного ребенка. К криоконсервации эмбрионов прибегают, если в данный момент нет возможности продолжать развитие ребенка. В этом случае можно отложить процесс зачатия на некоторое время.

Зачем проводится криоконсервация

Криоконсервация генетического материала осуществляется для его использования через некоторое время или предоставления бесплодным парам.

Криоконсервация генетического материала показана в следующих случаях:

• Невозможность присутствия биологического отца для предоставления спермы в день пункции яичников. Во время процедуры ЭКО яйцеклетки начинают оплодотворять после пункции в этот же день. Поэтому забор спермоматериала проводят параллельно. Если в планируемую дату отец не сможет присутствовать в клинике (командировка, лечение и пр.), его сперму предварительно замораживают.
• Участие в программе донорства. Донорский спермоматериал используют бесплодные пары, одинокие женщины, которые решили родить ребенка, а также люди с генетическими заболеваниями, которые могут передаваться по наследству. В этом случае донорский материал – единственная возможность стать родителями здорового ребенка. Для этих же целей используют донорские яйцеклетки.
• Онкологические заболевания. Лечение злокачественных опухолей подразумевает использование препаратов и процедур, которые имеют значительные побочные эффекты (химиотерапия, лучевая терапия). Одним из таких эффектов является появление бесплодия. Поэтому перед началом проведения лечения, пациент может осуществить криоконсервация эмбрионов или спермоматериала. После выздоровления пациенты смогут иметь детей благодаря этой процедуре.
• Необходимость отсрочить процесс беременности. В некоторых ситуациях мужчина или женщина не планируют заводить ребенка именно сейчас. Однако, чтобы «подстраховаться на будущее», они проводят криоконсервацию эмбрионов или сперматозоидов.

С помощью криоконсервации генетического материала можно провести процедуры вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО, ИКСИ, искусственная инсеминация и т.д.) в репродуктивной клинике «Центр ЭКО» города Волгоград. Специалисты клиники имеют высокую квалификацию и большой опыт устранения бесплодия.

Как происходит криоконсервация

Для криоконсервации используют очень низкие температуры. Стандартом является -196оС. Сосуды с генетическим материалом помещают в жидкий азот, который и обеспечивает данную температуру. Использовать более высокие температуры для хранения данного биологического материала нецелесообразно, поскольку они малоэффективны и не позволяют сохранить репродуктивную функцию.

Использование низких температур останавливает биологические процессы в клетках, в том числе и обмен веществ и энергией с окружающей внешней средой, что способствует их сохранению сколь угодно долго. Максимальный период хранения сказать точно нельзя. Зафиксирован случай использования спермы, которая находилась в заморозке около 20 лет, при этом не утратив своих биологических функций.

Замороженный генетический материал хранится в специальных контейнерах, которые называются сосуды Дьюара. Для криоконсервации эмбрионов используют специальные соломинки, где они хранятся по одному или в паре. Спермоматериал хранят в микропробирках.

Методы криоконсервации

Основную проблему во время криоконсервации представляет внутриклеточная жидкость. При замораживании она способна превращаться в кристаллы льда, которые могут повредить структуру клеток при размораживании. Поэтому, главная задача во время криоконсервации – избежать формирования внутриклеточного льда.

Для этого применяют два способа:

• Медленный способ. Этот способ заключается в медленном удалении жидкости из клетки (дегидратация).
• Быстрый способ (витрификация). Возникновение кристаллизации не допускается путем образования стекловидных структур.

У каждого из вышеуказанных методов есть свои преимущества и недостатки. Выбор способа заморозки будет зависеть от типа клетки или ткани и их биологических характеристик.

Криоконсервация спермы

Сперматозоиды хорошо переносят заморозку и размораживание, поэтому их широко применяют в донорских программах. Перед криоконсервацией сперматозоидов мужчина проходит обследования, которые подтверждают ее качество. К данным исследованиям относятся:

• анализ крови на ВИЧ, сифилис, гепатиты В и С;
• анализ крови на цитомегаловирус;
• анализ отделяемого из уретры на микоплазму, уреаплазму, трепонему, хламидии;
• кариотипирование;

и другие исследования, полный перечень которых назначает лечащий врач.

Обязательно проводят спермограмму. Эякулят считается оптимальным для дальнейшего использования при следующих показателях:

• объем эякулята от 1 мл;
• концентрация сперматозоидов должна быть более 80 миллионов на мл;
• количество подвижных сперматозоидов в эякуляте более 60%;
• количество сперматозоидов без нарушения строения – от 60%.

Перед забором эякулята рекомендуется половое воздержание в течение 3-5 дней, не более. Забор спермоматериала проводится методом мастурбации с помещением эякулята в пластиковый контейнер. Рекомендуется осуществлять забор спермоматериала в репродуктивной клинике, поскольку он должен быть доставлен в лабораторию не позднее 3-х часов от момента забора с соблюдением правил транспортировки.

Криоконсервация яйцеклеток

Яйцеклетки – более сложные и нежные структуры, нежели сперматозоиды, и поэтому они более чувствительны к процессу криоконсервации и дальнейшего размораживания. Яйцеклетки часто подвержены внутриклеточным повреждениям и до недавнего времени не подвергались заморозке.

Криоконсервация эмбрионов

Криоконсервация эмбрионов может быть частью процедуры ЭКО, в процессе которой получают большее количество эмбрионов, которое необходимо для пересадки. Это делают при желании пары иметь второго ребенка без повторения протокола ЭКО или для подстраховки при неудачном исходе этого протокола.

Кроме того, криоконсервация эмбрионов показана при появлении синдрома гиперстимуляции яичников, когда перенос эмбрионов может не дать необходимый результат или ухудшить состояние женщины.

Еще одним показанием к криоконсервации эмбрионов является недостаточность эндометрия. В этом случае эмбрион также может не имплантироваться в стенку матки. У женщины осуществляют контроль роста эндометрия и когда он готов, переносят зрелые размороженные эмбрионы.

Эмбрионы хорошо переносят криоконсервацию и они успешно размораживаются, не теряя своих свойств, в 95% случаев.

Методы криоконсервации

Время чтения: мин.

Криоконсервация представляет собой лабораторный процесс замораживания половых клеток и эмбрионов для дальнейшего хранения на любой период.

Современные методы криоконсервации клеток позволяют сохранить химические свойства и биологические характеристики после размораживания.

К замораживанию обращаются в том случае, если в конкретный период отсутствуют возможность продолжения развития зародыша, а процесс зачатия требует отсрочки.

Благодаря возможностям криоконсервации миллионы бесплодных пар России получили возможность воспользоваться собственным или донорским генетическим материалом, чтобы зачать и родить долгожданного ребенка.

Основные методы криоконсервации

Важным фактором, который влияет на выбор конкретного способа криоконсервации, является остаток жидкости во внутриклеточном пространстве.

Агрессивная заморозка способствует образованию ледяных кристаллов, которые в дальнейшем могут повредить внутриклеточные структуры.

Чтобы избежать формирования льда, применяются два способа:

• Дегидратация – медленное замораживание эмбрионов, контролируемый способ криоконсервации, который заключается в удалении жидкости из клетки;
• Несбалансированная криоконсервация, для выполнения которой дополнительно применяется: Ультрабыстрое замораживание;Криоконсервация методом витрификации.

Дегидратация

Дегидратация представляет собой медленное охлаждение клетки, чтобы произошло обезвоживание яйцеклетки или эмбриона и формирование внутренних кристаллов снизилось. В этом случае внутриклеточная влага выходит наружу клеток, а крупные кристаллы остаются в пространстве между клетками. Эмбрионы в результате пребывают в балансе с постепенно застывающим раствором.

В процессе дегидратации клетки охлаждаются достаточно быстро, поэтому остается риск повреждения содержимого клетки кристаллизацией. Помимо этого, повышение концентрации солей в межклеточном пространстве может вызывать нарушение эмбриона или половой клетки токсинами. Процесс дегидратации требует более двух часов, а также использования дорогостоящих растворов для замораживания.

Ультрабыстрые методы криоконсервации

Методы криоконсервации эмбрионов ультрабыстрым способом заключаются в помещении клеток в химический раствор, а затем – в жидкий азот. В результате мелкие кристаллы льда практически не повреждают ткани зародыша или половых клеток.

Витрификация представляет собой не агрессивную заморозку, а переход жидкости в твердое состояние за счет повышения вязкости вещества.

Важными преимуществами витрификации является упрощение процессов охлаждения, исключение опасности повреждения клеток, а также отсутствие необходимости использования дорогостоящих химических реагентов.

Единственным недостатком данного метода является уровень химической токсичности растворов, который может снижаться или повышаться, в зависимости от концентрации криопротектора, температуры и времени хранения эмбриона.

Зачем применяется криоконсервация?

• Отсутствие возможности присутствия биологического отца в момент оплодотворения яйцеклетки в лабораторных условиях;
• Реализация программы донорства: овосейвинг и криоконсервация спермы выполняются в случае необходимости использования донорских половых клеток для достижения зачатия;
• Необходимость перенести запланированную беременность на неопределенный срок;
• Онкологические заболевания одного из партнеров, которые могут сохранить здоровые ооциты или сперматозоиды, а также осуществить химиотерапию или произвести лечение с токсичными медикаментами.

С помощью методик криоконсервации возможно осуществление эффективных процедур вспомогательных репродуктивных технологий, которые существенно повышают шансы бездетных семей и бесплодных пациентов получить долгожданную беременность.

Криоконсервация ооцитов и эмбрионов: как это происходит

Вспомогательные репродуктивные технологии дарят радость рождения ребенка огромному количеству людей. Неотъемлемой их частью является криоконсервация эмбрионов и ооцитов – процесс сохранения эмбрионов и яйцеклеток при низкой температуре.

Быстрое развитие современных технологий репродуктивной медицины постоянно улучшает эффективность и безопасность криоконсервации, которая используется для сохранения сперматозоидов с 1953 года. О первой беременности, которой удалось достичь с использованием этой технологии, было сообщено в 1983 году.

Что такое криоконсервация ооцитов?

Криоконсервация ооцитов – это процесс, во время которого женские яйцеклетки (ооциты) экстрагируют из организма, замораживают и сохраняют. Спустя некоторое время, когда женщина хочет забеременеть, ооциты размораживают, оплодотворяют и переносят полученные эмбрионы в матку.

Что такое криоконсервация эмбрионов?

Это процесс сохранения эмбрионов при низкой температуре в стадии эмбриогенеза, которая соответствует предимплантационному этапу. Позже эти эмбрионы размораживают и используют для имплантации в матку. Криоконсервация – очень важная часть большинства программ по экстракорпоральному оплодотворению.

Показания

Криоконсервация ооцитов чаще всего применяется у трех групп женщин:

• Больные раком, которым еще не начинали проводить химиотерапию или лучевую терапию. Эти методы лечения онкологических заболеваний вредят фертильности женщин.
• Женщины, использующие экстракорпоральное оплодотворение, которые отказываются от криоконсервации эмбрионов по религиозным или этическим причинам.
• Женщины, которые хотят сохранить молодые яйцеклетки для использования в будущем.

Криоконсервация эмбрионов проводится в следующих случаях:

• Для сохранения дополнительных эмбрионов, полученных во время экстракорпорального оплодотворения.
• Для предоставления дополнительных шансов забеременеть, если первое экстракорпоральное оплодотворение не удалось.
• Женщина может сохранить эмбрионы до того, как начать лечение рака, которое ухудшает ее фертильность.
• Эмбрионы могут быть сохранены и переданы другим женщинам в рамках программы донорства.
• Эмбрионы могут быть сохранены и переданы для научных исследований.

Плюсы и минусы

Криоконсервация эмбрионов и ооцитов является неотъемлемой частью вспомогательных репродуктивных технологий и имеет свои плюсы и минусы. Применение этих технологий позволяет испытать радость рождения ребенка огромному количеству людей по всему миру.

Научные исследования утверждают, что замораживание и размораживание ооцитов и эмбрионов не вредит будущему ребенку. У детей не наблюдается увеличения количества врожденных дефектов или других проблем со здоровьем. Подробнее об особенностях детей, рожденных в результате ЭКО →

К сожалению, ооциты и эмбрионы могут быть повреждены в результате процессов замораживания и размораживания, а также вследствие технических или человеческих ошибок. В учреждениях, занимающихся криоконсервацией, постоянно внедряются меры, направленные на минимизацию этих рисков.

Любые клетки, включая ооциты и эмбрионы, во время замораживания подвергаются различным действиям. Перед замораживанием их помещают в растворы потенциально токсических веществ-криопротекторов.

Во время замораживания клетки должны выдержать образование льда, резкие изменения температуры, концентрации электролитов и рН.

После таких нефизиологических изменений неудивительно, что некоторые ооциты и эмбрионы не выдерживают криоконсервацию.

Кроме этого, криоконсервация сопровождается следующими рисками:

• Осложнения, связанные с применением лекарственных средств, которые вызывают выделение многих яйцеклеток из яичников женщины. У некоторых пациенток развивается синдром гиперстимуляции яичников, при котором они увеличиваются в размерах, возникают боль в животе, вздутие кишечника, тошнота, рвота и диарея.
• Осложнения, связанные с процедурой извлечения яйцеклеток. Изредка использование аспирационной иглы для извлечения ооцитов может стать причиной кровотечения, инфицирования, повреждения кишечника, мочевого пузыря или кровеносных сосудов.
• Эмоциональные риски. Вспомогательные репродуктивные технологии дают надежду на рождение ребенка, однако не гарантируют этого.

Как осуществляется криоконсервация?

Перед процедурой криоконсервации необходимо получить ооциты или эмбрионы. Для этого проводится медикаментозная стимуляция выделения большого количества яйцеклеток из яичников и их извлечение из организма.

Если замораживают эмбрионы, перед криоконсервацией проводится экстракорпоральное оплодотворение яйцеклеток.

Для защиты ооцитов и эмбрионов от криоповреждения перед замораживанием их помещают в специальные растворы, содержащие криопротекторные вещества.

Существует 2 вида криопротекторов – проникающие внутрь клетки (например, пропандиол) и внеклеточные (например, сахароза).

 Они снижают температуру замерзания и предотвращают образование льда внутри клеток, а также защищают клетки, взаимодействуя с их оболочкам во время замерзания.

Существует два основных метода криоконсервации:

• Медленное программируемое замораживание – это разработанные в начале 1970-х годов методики, которые замораживают ооциты и эмбрионы с регулируемой скоростью. После достижения определенной температуры они помещаются в жидкий азот. Скорость снижения температуры составляет примерно 1°C в минуту.
• Витрификация – более новая методика криоконсервации, которая характеризуется формированием стеклоподобной субстанции и отсутствием повреждения клеток от образования кристаллов льда. При ее применении к замораживаемым ооцитам или эмбрионам добавляют криопротекторы, снижающие температуру замерзания и повышающие вязкость. Замораживание ооцитов и эмбрионов при витрификации происходит намного быстрее.

Как происходит процесс размораживания эмбрионов?

Процесс размораживания действует в обратном направлении. Замороженный эмбрион достают из жидкого азота. По мере размораживания из клеток постепенно удаляют криопротектор, замещая его водой.

Для этого эмбрион помещают в более и более разбавленные растворы, каждый из которых содержит все меньше криопротектора.

Процесс тщательно контролируется, чтобы во время размораживания клетки не были повреждены.

Затем эмбрион доводят до температуры тела и помещают в матку матери или в питательную среду в инкубаторе до имплантации. Перед помещением в матку эмбрионы проходят тщательную проверку.

Лекарства перед переносом эмбрионов

Для того чтобы увеличить шансы на успешную беременность, проводится медикаментозная подготовка к переносу криоконсервированных эмбрионов.

Для подготовки матки чаще всего используются гормональные препараты. Сперва необходимо подавить гипофиз, благодаря чему уменьшается риск возникновения нежелательной овуляции. Обычно для подавления гипофиза применяют препарат Люпрон. В большинстве случаев его назначают в виде инъекций 1 раз в день в течение 2 недель.

Затем применяют гормоны, которые дублируют изменения, возникающие в норме в матке при обычном менструальном цикле.

Для этого назначают:

• Препараты эстрогена. Они действуют на матку, способствуя утолщению и созреванию эндометрия. Длительность приема может быть разной, ее определяет врач на основании состояния слизистой оболочки матки.
• Препараты прогестерона. Назначают после достижения достаточной толщины эндометрия в матке. После начала их приема отменяют Люпрон. Прогестерон делает слизистую матки восприимчивой к имплантации эмбриона.

Если менструальные циклы у женщины регулярные, перенос эмбриона можно осуществить без гормональной подготовки.

Как происходит процесс переноса эмбрионов?

Размороженные эмбрионы переносят в полость матки с помощью тоненького катетера. Эта процедура очень похожа на взятие мазка из шейки матки. Для ее проведения не нужна анестезия.

Эмбрион помещается в небольшом количестве жидкости внутри катетера, который заводят через шейку в полость матки, достигая ее верхней части. Иногда для более точной имплантации перенос осуществляют под контролем ультразвукового исследования.

Подсадка эмбриона после криоконсервации может вызвать умеренные спазмы, очень редко развиваются кровотечение или инфекционные осложнения.

Возможный исход

Показатели успешности переноса криоконсервированных эмбрионов зависят от многих факторов, включая учреждения, в которых он проводится, возраст и состояние здоровья женщины. В среднем, успешная беременность наступает в 50-60% случаев.

Как и при любой беременности, существуют следующие риски:

• Выкидыши. Риск выкидыша в случае наступления беременности после переноса замороженного эмбриона составляет примерно 10-20%. Эти цифры не отличаются от показателей, наблюдаемых при естественном зачатии. Риск выкидыша значительно уменьшается после появления сердцебиения у плода.
• Эктопическая (внематочная) беременность. Эмбрион может не имплантироваться в нужном месте матки, переместиться в область фаллопиевых труб и стать причиной внематочной беременности.
• Многоплодная беременность. Большинство вспомогательных репродуктивных технологий характеризуются увеличением возможности многоплодной беременности, так как часто в полость матки переносят несколько эмбрионов.

Возможна ли криоконсервация больше одного раза?

Иногда, если были заморожены многие эмбрионы, размораживают несколько из них. Для переноса выбирают лучшие из эмбрионов, а другие криоконсервируют опять. Однако при использовании этих повторно замороженных эмбрионов показатели успешности снижаются.

Влияет ли это на развитие детей?

• Научные данные указывают, что применение криоконсервации ооцитов и эмбрионов не увеличивает риск развития врожденных пороков и других проблем со здоровьем, по сравнению с детьми, зачатыми естественным путем.
• Криоконсервация эмбрионов и ооцитов уже давно стала неотъемлемой частью методов экстракорпорального оплодотворения, которые подтвердили свою эффективность огромным количеством успешных беременностей.
• Тарас Невеличук, врач,специально для Mama66.ru